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加樣的各步優化:
A、一般情況下有三次加樣,它們分別是加標本,加酶結合物,加底物。
B、凍結血清融解后,蛋白質局部濃縮,分布不均,應充分混勻宜輕緩,避免氣泡,可上下倒置混和,不要在混勻器上強烈振蕩。
C、制備血漿標本需借助于抗凝劑,而血清標本只要待血清天然凝固、收縮后即可取得。D、也可在板孔中加入稀釋液,再在其加入血清標本,然后在微型震蕩器上震蕩1分鐘以保證混和。
E、一般說來,在5天內測定的血清標本可放置于4℃,超過一周測定的需低溫冰存。
ELISA試劑盒實驗標本采集必修課:
1)不能檢測含NaN3 的樣品,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
2)標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗,若不能
馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融。
3)細胞上清液:3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4)血清:使用不含熱原的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
5)血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝,3000轉離心30分鐘取上清。
6)組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎,3000轉離心10分鐘取上清。
7)保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
研域(上海)化學試劑有限公司使我們對以前一些難以檢測的生物活性物質的測定變得輕而易舉,并且大大提高了檢測的靈敏度和特異性,并不與其它細胞因子反應,板內、板間變異系數均小于10%,保證高品質產品性能的同時,也能兼顧成本,為您節約實驗經費。