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    上海研域技術師分析ELISA試劑盒操作步驟法

    發布時間: 2017-08-11  點擊次數: 1191次

    ELISA試劑盒組成
    130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶
    2酶標試劑6ml×1瓶8標準品(80U/L)0.5ml×1瓶
    3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶
    4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份
    5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張
    6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個
    ELISA試劑盒標本要求
    1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融
    2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
    昆蟲胸苷酸合成酶(thyA)elisa測定試劑盒操作步驟
    1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
    40U/L5號標準品150µl的原倍標準品加入150µl標準品稀釋液
    20U/L4號標準品150µl的5號標準品加入150µl標準品稀釋液
    10U/L3號標準品150µl的4號標準品加入150µl標準品稀釋液
    5.0U/L2號標準品150µl的3號標準品加入150µl標準品稀釋液
    2.5U/L1號標準品150µl的2號標準品加入150µl標準品稀釋液
    ELISA試劑盒注意事項
    1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
    2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
    3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
    4.請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(×n×5)。
    5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
    6.底物請避光保存。
    7.嚴格按照昆蟲胸苷酸合成酶(thyA)elisa測定試劑盒說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
    8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
    9.本試劑不同批號組分不得混用。
    ELISA試劑盒計算
    以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實際濃度。
     

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