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    如何正確解決ELISA試劑盒

    發(fā)布時(shí)間: 2018-09-21  點(diǎn)擊次數(shù): 1744次

    ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中常會(huì)遇到這些疑問:    
    1. 溫育條件紛歧致,恒溫箱溫育較水浴顯色深,OD值高出0.1-0.15,均選用恒溫箱。如用水浴水溫應(yīng)控制在37℃。    
    2. 樣品數(shù)量紛歧,加樣時(shí)刻長(zhǎng)短紛歧。當(dāng)重復(fù)某一樣品時(shí),加樣時(shí)刻盡可能與初度靠近。    
    考慮到有些客戶沒有實(shí)驗(yàn)設(shè)備,我公司還可以供給代測(cè)效能,只需付試劑盒的費(fèi)用,代測(cè)是免費(fèi)的哦!
    間接法 :此測(cè)定方法與直接法類似,紛歧樣在于一級(jí)抗體沒有酶符號(hào),改用酶符號(hào)的二級(jí)抗體去辨識(shí)一級(jí)抗體來測(cè)定抗原量。    
    雙抗體夾心法 :被檢查的抗原包被在兩個(gè)抗體之間,其間一個(gè)抗體將抗原固定于固相載體上,即捕捉抗體。
    ELISA試劑盒另一個(gè)則是檢查抗體,此抗體可用酶符號(hào)后直接測(cè)定抗原的量;或不符號(hào),再透過酶符號(hào)的二級(jí)抗體來測(cè)定抗原的量。
    這兩種抗體有必要留心選擇,才可防止交互反響或競(jìng)賽一樣的抗原聯(lián)絡(luò)部位。        
    競(jìng)賽法:樣本里的抗原(悠閑抗原)和純化并固定在固相載體上的抗原(固定抗原)一同競(jìng)賽一樣的抗體,當(dāng)樣品里的悠閑抗原越多,就可以聯(lián)絡(luò)越多的抗體,而固定抗原就只能聯(lián)絡(luò)到較少的抗體,反之亦然。
    經(jīng)清潔進(jìn)程,洗去悠閑抗原和抗體的復(fù)合物,只留下固定抗原和抗體的復(fù)合物,拿來與只需固定抗原的對(duì)照組效果相比較,根據(jù)呈色差異就可計(jì)算出樣品里的抗原含量。
    ELISA試劑盒直接法 :將抗原直接固定在固相載體上,參加酶符號(hào)的一級(jí)抗體,即可測(cè)定抗原總量,此一級(jí)抗體的特異性非常重要。

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