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    上海研域-ELISA試劑實驗細(xì)節(jié)盤點

    發(fā)布時間: 2023-08-15  點擊次數(shù): 1151次

    ELISA細(xì)節(jié)盤點

    1. 樣本收集

    每個標(biāo)本量收集體積=100ulx檢測指標(biāo),如要做復(fù)孔,標(biāo)本量收集體積=10Oul×檢測指標(biāo)×2。對收集后當(dāng)天進(jìn)行檢測的標(biāo)本,儲存在4℃?zhèn)溆茫缬刑厥庠蛐枰芷谑占瘶?biāo)本,將標(biāo)本及時分裝后放在-20°℃或-70°℃條件下保存,避免反復(fù)凍融。標(biāo)本2-8℃可保存48小時,-20°℃可保存1個月。-70度可保存6個月。部分激素類標(biāo)本需添加抑肽酶。如需離心的樣本,離心轉(zhuǎn)速不宜過高(2000~3000)

    2. ELISA加樣

    加樣品時,單孔用量要求: ≥50ul/指標(biāo),如需要做2個復(fù)孔則血量≥100ul/指標(biāo)。如果樣本量不充足,具體用量可咨詢您的專屬銷售。

    3. 樣品捕獲抗體孵育

    37C恒溫孵育,避免溫度變化過大

    4. 洗滌

    機(jī)洗: 將25x×洗滌緩沖液稀釋成1×,1×洗滌緩沖液洗三次,每次加300uL浸泡60s手洗:手洗次數(shù)應(yīng)比機(jī)洗次數(shù)多,浸泡時間也應(yīng)適當(dāng)延長

    手洗容易導(dǎo)致吸附在酶標(biāo)板底部的試劑脫落,從而導(dǎo)致結(jié)果偏小,手洗次數(shù)過多也會影響實驗結(jié)果,建議機(jī)洗

    5. 底物顯色(TMB顯色) 孵育

    TMB在使用前應(yīng)放置室溫平衡30分鐘,加的量為A、B各50uL

    6. ELISA終止液終止反應(yīng)

    加完TMB終止液應(yīng)讓其混勻再在酶標(biāo)儀上讀數(shù)

    7. 酶標(biāo)儀讀數(shù)

    在450nm波長處測定O.D值

    8. 根據(jù)O.D值計算樣本濃度

    使用軟件擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線的擬合度(r或R2)以及殘差平方和(s)選擇合適的曲線。

    上海研域生物有限公司,生命科學(xué)和生物醫(yī)學(xué)域十余年,是集研發(fā)、生產(chǎn)、銷售于一體的專業(yè)生物公司。公司目前可以提供多種生物學(xué)檢測試劑盒、進(jìn)口常規(guī)生化ELISA試劑、抗體、標(biāo)準(zhǔn)品、血清等產(chǎn)品。如果您有實驗方面的需求和問題,都可以聯(lián)系我們,歡迎咨詢。

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