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    上海研域生物為您總結人支氣管成纖維細胞的分離培養方法

    發布時間: 2024-08-26  點擊次數: 1725次

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    支氣管成即無紋肌的通稱,平滑肌是由長紡錘形的單核細胞構成。它不構成獨立的器官,而只是成為構成體壁和內臟壁的因素(肌層)。平滑肌細胞互相連接,形成管狀結構或中空器官;在功能上可以通過縮短和產生張力使器官發生運動和變形,也可產生連續收縮或緊張性收縮,使器官對抗所加負荷而保持原有的形狀。

    人支氣管成纖維細胞的收縮、舒張、增殖和凋亡與許多疾病的病理生理過程有關.如支氣管哮喘、慢性阻塞性肺疾病等。例如在哮喘發病時,可以檢測到氣管平滑肌發生數目的增生和肥大,表型也發生改變,由收縮型轉為合成型與分泌型,并分泌多種與細胞因子;而且出現向氣管腔遷移的跡象。

    人支氣管成纖維細胞的分離培養

    1. 取4-5周齡的小鼠,斷頸處死后,泡于75%的酒精中

    2. 剖開胸腔,取出完整氣管及肺組織,放入無菌PBS中

    3. 在體視顯微鏡下,小心分離出下游支氣管

    4. 用眼科剪及鑷子分離肌層并剪碎

    5. 加入0.1% I + II + IV + dispase,4℃過夜消化

    6. 第二天置于37℃水浴搖床中消化2~3h

    7. 待液體變渾濁后加入*培養基終止消化,充分吹打

    8. 過100目篩網,收集濾液,1000rpm離心5min,棄去上清

    9. 用培養基重懸沉淀,鋪瓶。

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