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    大鼠白介素12(IL-12/P70)ELISA試劑盒操作步驟

    發(fā)布時(shí)間: 2014-07-03  點(diǎn)擊次數(shù): 1877次

    大鼠白介素12(IL-12/P70)ELISA試劑盒    Rat Interleukin 12,IL-12/P70 ELISA Kit    ,規(guī)格:96T/48T,產(chǎn)品別名:    大鼠白介素12(IL-12/P70)檢測(cè)試劑盒
    大鼠白介素12(IL-12/P70)ELISA試劑盒原理的簡(jiǎn)要說(shuō)明書:IL-12,白介素12。IL12對(duì)免疫的多向性調(diào)節(jié)作用,所具有的促進(jìn)γ-干擾素分泌和增強(qiáng)TH1細(xì)胞的能力,使其具有抗感染、抗腫瘤和抗移植器官的功能。和大多數(shù)白介素不同的是,活性IL12是由一條重鏈(P40)和一條輕鏈(P35)構(gòu)成的二聚體。P40由嚴(yán)格限定的細(xì)胞合成,P35則很多細(xì)胞都可產(chǎn)生。但活性IL12只能由同時(shí)可合成P40、P35的細(xì)胞產(chǎn)生。這些細(xì)胞內(nèi)常常P40產(chǎn)量高于P35,以至有大量P40同聚體形成。        
    大鼠白介素12(IL-12/P70)ELISA試劑盒操作步驟
    1.取出酶標(biāo)板,設(shè)空白孔,依照次序?qū)?yīng)分別加入100μl的標(biāo)準(zhǔn)品于空白微孔中(空白孔視為0號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品,用醫(yī)用蒸餾水替代)
    2、分別標(biāo)記樣品編號(hào),加入100μl的稀釋樣品于空白微孔中(不同的樣本采用不同的吸頭)。
    3、將酶標(biāo)板置于37℃溫育30分鐘;
    4、將酶標(biāo)板板取出,將其中的液體甩去,每個(gè)孔中全部加滿應(yīng)用洗滌液后,立即甩去液體;
    5、每個(gè)孔中加滿應(yīng)用洗滌液后,輕微振搖酶標(biāo)板30秒后將孔中的應(yīng)用洗滌液甩去,在吸水紙上將酶標(biāo)板拍干。
    6、重復(fù)第5個(gè)步驟5次,在吸水紙上將酶標(biāo)板拍干。
    7、在標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣品孔中加入100μl的酶標(biāo)偶合溶液。
    8、將96孔板置于37℃溫育30分鐘。
    9、將酶標(biāo)板取出,將其中的液體甩去,每個(gè)孔中全部加滿應(yīng)用洗滌液后,立即甩去液體。
    10、每個(gè)孔中再次加滿洗滌應(yīng)用液后,室溫輕微振搖酶標(biāo)板30秒后將孔中的應(yīng)用洗滌液甩去,在吸水紙上將酶標(biāo)板拍干。
    11、重復(fù)第5個(gè)步驟5次,在吸水紙上將酶標(biāo)板拍干。
    12、在每個(gè)孔中加入底物A 50μl后立即加入底物B 50μl。輕輕振蕩混勻。(A液、B液采用不同的吸頭加樣)
    13、將酶標(biāo)板置于37℃避光溫育反應(yīng)15分鐘。
    14、每個(gè)微孔中加入50μl的終止液,輕輕振蕩混勻。
    15、在酶標(biāo)儀上,450nm處測(cè)定OD; 顯色后,15分鐘內(nèi)進(jìn)行測(cè)定。
    16、根據(jù)制備的標(biāo)準(zhǔn)曲線,計(jì)算樣本含量

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